Relationship between the toxicity of raw Annona muricata leaves extract and 7,12-dimethylbenzathracene (DMBA) with histopathological changes in wistar rats / Relación entre la toxicidad del extracto de hojas crudas de Annona muricata y el 7,12-dimetilbenz antraceno (DMBA) con cambios histopatológicos en ratas Wistar

Abstract Aims: To identify the histopathological alterations in organs of Wistar rats to evaluate toxic effects of use of Annonamuricata Raw Leaf Extract (AMRLE) alone or in association with DMBA. Settings and Design: Sixty female Wistar rats were used, separated into groups and treated with a single dose of 65 mg/kg of DMBA and/or with 50; 100 and 200 mg/kg of AMRLE. Hematoxylin-Eosin (HE) and 1% methylene blue stains were used in the histopathological analysis and quantification of Aberrant Crypts (ACs) and Aberrant Crypt Focus (ACF). Fischer and Kruskal Wallis tests were used in the statistical analysis. Results: The administration of 65 mg/kg of DMBA and/or 50, 100 and 200 mg/kg of AMRLE did not influence weight development. Some histopathological alterations (hepatic steatosis; inflammatory foci in the liver, kidney and lung; pulmonary lymphoid hyperplasia, ectasia and hyperplasia in mammary gland epithelium) and the development of ACs and ACF in the intestinal colon were observed in all groups, except in the group negative control, with no statistical difference between analysed groups. Conclusions: Histopathological alterations and the formation of ACs and ACF did not show a statistically significant difference between the groups analysed. However, although AMRLE has antioxidant effects due to the presence of phenolic components, there was still the formation of some pathological processes that may be related to the isolated toxic action of DMBA and/or associated with other components of AMRLE, since these changes were not seen in the negative control group.

Resumen Objetivos: Identificar las alteraciones histopatológicas en órganos de ratas Wistar para evaluar los efectos tóxicos del uso del Extracto de Hoja Cruda de Annona muricata (AMRLE) solo o en asociación con DMBA. Configuración y diseño: Se utilizaron sesenta ratas hembras Wistar, se separaron en grupos y se trataron con una dosis única de 65 mg/kg de DMBA y/o con 50, 100 y 200 mg/kg de AMRLE. Se utilizaron tinciones de hematoxilina-eosina (HE) y azul de metileno al 1% en el análisis histopatológico y la cuantificación de criptas aberrantes (CA) y focus de criptas aberrantes (FCA). En el análisis estadístico se utilizaron las pruebas de Fischer y Kruskal Wallis. Resultados: La administración de 65 mg/kg de DMBA y/o 50, 100 y 200 mg/kg de AMRLE no influyó en el desarrollo del peso. Se observaron algunas alteraciones histopatológicas (esteatosis hepática; focus inflamatórios en el hígado, riñón y pulmón; hiperplasia, ectasia en epitelio de la glándula mamaria e hiperplasia linfoide pulmonar) y el desarrollo de CA y FCA en el colon intestinal en todos los grupos, excepto en el grupo control negativo, sin diferencias estadísticas entre los grupos analizados. Conclusiones: Las alteraciones histopatológicas y la formación de CA y FCA no mostraron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos analizados. Sin embargo, aunque AMRLE tiene efectos antioxidantes debido a la presencia de componentes fenólicos, aún existe la formación de algunos procesos patológicos que pueden estar relacionados con la acción tóxica aislada del DMBA y/o asociados con otros componentes de AMRLE, ya que estos cambios no fueron observados en el grupo control negativo.

PATHOGENICITY OF Blastocystis sp. TO THE GASTROINTESTINAL TRACT OF MICE: RELATIONSHIP BETWEEN INOCULUM SIZE AND PERIOD OF INFECTION / Histopatogenicidade de Blastocystis sp. para o trato gastrointestinal de camundongos: relação com inóculo e tempo de infecção

The pathogenic potential of Blastocystis sp. in experimental models requires further investigation. In this work, the pathogenicity of this parasite in the gastrointestinal tract of male Swiss mice was evaluated according to the inoculum size and period of infection. Animals were infected intragastrically, with 100, 500, 1,000, 5,000 and 10,000 Blastocystis sp. vacuolar forms obtained from a mixture of eight human isolates cultured axenically in Jones' medium. After seven, 14, 21, 28 and 60 days of infection, the animals were sacrificed and fragments of the small intestine (duodenum), large intestine, and cecum were subjected to histopathological analysis. Blastocystis sp. triggered an inflammatory response in the different tissues analyzed, with a predominance of mononuclear cells. The parasite was found in the muscular layer of the cecum, showing its invasive character. Larger inocula triggered inflammatory processes earlier (seven days) than smaller ones (from 21 days). We conclude that, in the proposed model, the pathogenicity of Blastocystis sp. isolates that were studied is related to inoculum size and period of infection.

Pouco é sabido sobre o potencial patogênico de Blastocystis sp. em modelos experimentais. Neste trabalho a patogenicidade desse parasito para o trato gastrointestinal de camundongos Swiss machos foi avaliada de acordo com o inóculo e tempo de infecção. Os animais foram infectados, via intragástrica, com 100, 500, 1.000, 5.000 e 10.000 formas vacuolares de Blastocystis sp. obtidos a partir de uma mistura de oito isolados humanos cultivados axenicamente em meio Jones. Após 7, 14, 21, 28 e 60 dias de infecção os animais foram sacrificados e fragmentos do intestino delgado (duodeno), grosso e ceco foram retirados para análise histopatológica. Blastocystis sp. desencadeou resposta inflamatória nos diferentes tecidos analisados, com predominância de infiltrado mononuclear. No ceco o parasito foi encontrado na túnica muscular mostrando seu caráter invasivo. Inóculos maiores desencadearam processos inflamatórios mais precocemente (7 dias) e inóculos menores mais tardiamente (a partir de 21 dias). Conclui-se que no modelo proposto a patogenicidade dos isolados de Blastocystis sp. estudados tem relação com o inóculo e tempo de infecção.

Trypanocidal activity of genotoxic concentration of benznidazole on epimastigote forms of Trypanosoma cruzi / Atividade tripanocida da concentração genotóxica do benzonidazol em formas epimastigotas de Trypanosoma cruzi

The genotoxicity of benznidazole at a concentration of 75 µM, used in the treatment of Chagas' disease, has been recently reported. The present study evaluated the inhibitory effect of benznidazole on the growth of epimastigote forms of T. cruzi I and II by using genotoxic (75 µM) and non-genotoxic (50 µM) concentrations. To assess the growth rates of T. cruzi strains G2, A2.1A, CL, Y, and 2052, parasites in the epimastigote form were cultured in LIT medium for 192 h at 28ºC, with (50 and 75 µM) and without (negative control) benznidazole. Benznidazole at both concentrations inhibited all the strains, regardless of genetic group. In the 75 µM concentration, there was a significant decrease in the number of parasites inoculated at T0 after 96 h incubation. The results showed that although genotoxic and non-genotoxic doses of benznidazole inhibit the growth of the epimastigote forms of T. cruzi I and II, only the 75 µM dose seem to indicate a possible trypanocidal effect.

O benzonidazol é um medicamento utilizado no tratamento da doença de Chagas, cuja genotoxicidade foi recentemente observada em concentrações a partir de 75 µM. O efeito inibitório do benzonidazol sobre o crescimento de formas epimastigotas de T. cruzi I e II foi avaliado no presente trabalho, utilizando-se concentrações genotóxica (75 µM) e não genotóxica (50 µM) deste medicamento. Para avaliação da taxa de crescimento das cepas G2, A2.1A, CL, Y e 2052, os parasitos na forma epimastigota foram cultivados em meio LIT, durante 192 horas, à 28 o C, tanto em presença de benzonidazol (50 e 75 µM), quanto em sua ausência (controle negativo). O efeito inibitório do benzonidazol, em ambas concentrações, foi observado para todas as cepas analisadas, independentemente do grupo genético a que pertençam. Na concentração de 75 µM, observou-se após 96 horas de incubação, redução significativa do número de parasitos inoculados no tempo zero (T0). Os resultados demonstraram que tanto a dose genotóxica quanto a não genotóxica do benzonidazol inibiram o crescimento de formas epimastigotas de T. cruzi I e II, porém somente a dose de 75 µM pode indicar um possível efeito tripanocida.

Fatores associados ao consumo de bebidas alcoólicas pelos adolescentes de uma Escola Pública da cidade de Maringá, Estadodo Paraná / Factors associated with the consumption of alcoholic beverages by adolescents from a Public School in Maringá, Paraná State

Atualmente, há tendência no aumento do consumo de bebidas alcoólicas,principalmente pelos adolescentes. Neste trabalho, os fatores associados ao consumo de bebidas alcoólicas pelos adolescentes de uma escola pública foram identificados. As informações foram coletadas pela aplicação de questionários. No grupo dos adolescentes que consomem bebidas alcoólicas, verificou-se que muitos pais ou responsáveis estão cientes desse consumo, e 32,30% dos adolescentes admitiram que iniciaram o hábito debeber com membros da família, enquanto os demais relataram que foi por influência de amigos. O vinho e a cerveja foram as bebidas alcoólicas mais consumidas pelos adolescentes.Estes resultados demonstram que a sociedade é permissiva quanto ao hábito dos adolescentes consumirem bebidas alcoólicas. Este consumo pode ter como objetivo contornar dificuldades de convívio social, mas também aumenta a chance do jovem ter comportamento de risco, levando ao envolvimento com acidentes automobilísticos. Por isso, o estabelecimento de programas educacionais destinados aos adolescentes e também aos pais ou responsáveis é necessário para que haja maior conscientização sobre os efeitosnocivos do consumo exagerado de bebidas alcoólicas.

Nowadays, there is a trend towards the increase in alcoholic beverage consumption, mainly by adolescents. Inthis study, factors associated with the consumption of alcoholic beverage by adolescents from a Public sSchool were identified. The data were collected by means for individual interviews conducted by questionnaire. In the group of adolescents who consume alcoholic beverages, it was verified that often guardians or parents are aware of this consumption, and 32.30% of adolescents admitted they began the habit of drinking with family members,while the remainder declared it was the influence of friends. Wine and beer were the most consumed alcoholic beverages by adolescents. These results demonstrate that society is permissive towards the habit of teenage drinking. This consumption might be an attempt toavoid the difficulties of social settings, but it must be emphasized that the consumption of these substances increases the possibility of young people displaying risk behaviors, leadingto involvement with car accidents. For this reason, the establishment of educational programs aimed at adolescents as well as their parents or guardians are necessary, in order toraise awareness of the harmful effects of the excess alcohol consumption.

Identificação de distúrbios da imagem corporal e comportamentos favoráveis ao desenvolvimento da bulimia nervosa em adolescentes de uma Escola Pública do Ensino Médio de Maringá, Estado do Paraná / Identifying body image disorders and behaviors leading to the development of bulimia nervosa in adolescents from a Public High School in Maringá, Paraná State

Ciente da importância de estudos de transtornos alimentares em adolescentes, este trabalho identificou a ocorrência de distúrbios da imagem corporal e de bulimia nervosa, em 187 adolescentes. Pelo Body Shape Questionnaire (BSQ), foi demonstrado que 48,13% dos adolescentes apresentaram distúrbios de imagem corporal. A aplicação do Teste de Investigação Bulímica de Edimburgo (BITE) demonstrou que 3,74 e 39,04% dos adolescentes apresentaram alto e médio grau de desordem alimentar, respectivamente. Na subescala de gravidade do BITE, verificou-se que 2,67 e 7,49% dos adolescentesapresentaram gravidade alta e moderada de bulimia nervosa. Os resultados demonstram alguns adolescentes com atitudes e comportamentos que favorecem o desenvolvimento da bulimia nervosa, devido à percepção distorcida da própria imagem corporal. Portanto, sãonecessárias campanhas educacionais para esclarecer que o culto ao corpo está associado a graves transtornos alimentares.

Conscious of the importance of studying eating disorders in adolescents, this work identified the onset of body image disorders and bulimia nervosa in187 adolescents. Using the Body Shape Questionnaire (BSQ), it was shown that 48.13% of adolescents displayed body image disorders. The application of the Bulimic Investigatory Test, Edinbugh (BITE) demonstrated that 3.74 and 39.04% of adolescents presented a highor medium level of eating disorder, respectively. In the subscale of BITE severity, it was detected that 2.67 and 7.49% of adolescents showed high and moderated gravity of bulimia nervosa. The results revealed some adolescents with attitudes and behaviors that favor the development of bulimia nervosa, due to a distorted perception of their body image. Therefore, educational campaigns are necessary to clarify that the cult of the body is associated with serious eating disorders.

Vegetative compatibility and molecular characterization of Fusarium graminearum isolates from the State of Paraná, Brazil

Fusarium graminearum isolates causing Fusarium head blight in wheat were collected in Brazil and analyzed by random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers and vegetative compatibility grouping (VCG). Nitrate non-utilizing mutants (nit) from each isolate were paired to verify heterokaryon formation. Three VCGs were identified among F. graminearum isolates: VCG1 included F-2, F-3 and F-4 isolates; VCG2 included F-1, F-6 and F-9 isolates; VCG3 included F-5, F-7 and F-8 isolates. Based on PCR amplification with eight different primers, the isolates showed great genetic similarity among themselves. Dendrogram analysis demonstrated two RAPD groups: Group A, consisting of isolates F-2 and F-9, and Group B, composed of the remaining isolates. Results suggest the clonal origin of F. graminearum isolates.

Isolados de Fusarium graminearum, obtidos de espigas de trigo com sintomas de Giberela, foram analisados pela técnica do Polimorfismo de DNA Amplificado ao Acaso (RAPD) e pelos Grupos de Compatibilidade Vegetativa (GCV). Mutantes auxotróficos (nit) de cada isolado foram pareados em todas as combinações possíveis, para a formação de heterocários. Três GCVs foram identificados: GCV1, incluindo os isolados F-2, F-3 e F-4; GCV2, incluindo os isolados F-1, F-6 e F-9; e GCV3, formado pelos isolados F-5, F-7 e F-8. Dois grupos foram identificados com base nos marcadores de RAPD: o grupo A, formado pelos isolados F-2 e F-9, e o grupo B, composto pelos demais isolados, os quais apresentaram grande similaridade entre si. Os resultados sugerem a origem clonal dos isolados de F. graminearum analisados.

Ocorrência de anorexia nervosa e distúrbio de imagem corporal em estudantes do ensino médio de uma escola da rede pública da cidade de Maringá, Estado do Paraná / Occurrences of nervous anorexy and body image disorder in middleschool students in the city of Maringá, State of Paraná

Este trabalho investiga a ocorrência de anorexia nervosa e distúrbio de imagem corporal em 187 estudantes do ensino médio da cidade de Maringá, Estado do Paraná. O Índice de Massa Corporal (IMC) e a classificação do estado nutricional foram utilizados para a avaliação antropométrica. A análise das respostas do questionário Body Shape Questionnaire (BSQ) demonstrou que 66,1% das estudantes do sexo feminino apresentaram distúrbios de imagem corporal e somente 18,6% dos estudantes do sexo masculino apresentaram tal distúrbio. Com relação às respostas ao questionário Teste de Atitudes Alimentares (EAT), verificou-se que 10% do sexo masculino e 32% do sexo feminino apresentaram sintomatologia anoréxica. Os resultados sugerem uma elevada incidência da anorexia nervosa na população estudada bem como uma significativa presença de distorção da imagem corporal. As informações são relevantes para estudos clínicos voltados para orientação nutricional dos adolescentes visando à reeducação alimentar.

This study investigates the occurrence of nervous anorexy and body image disorders in 187 middle school students in the city of Maringá, State of Paraná, Brazil. Body Mass Index (BMI) and the classification of the nutritional state were used to the anthropometrical evaluation. The analysis of the questionnaire BSQ answers demonstrated that 66.1% of female students presented the body image disorder, and only 18.6% of male students presented such disorder. Regarding the questionnaire EAT answers, the analysis showed that 32% female and 10% male sex presented anorexic symptoms. The obtained results indicated high incidence of nervous anorexy in the population studied as well as a significant presence of body image distortion. These results are relevant to clinic studies of teenagers, mainly those directing to future studies on nutritional orientation focusing on alimentary reeducation.

Importância da aplicação de critérios morfológicos não-clássicos para o diagnóstico citopatológico de papillomavirus humano (HPV) previamente detectado por PCR / The application and its importance in non-classic morphologic approaches to cytopathology diagnostic of human papillomavirus (HPV) previously detected for PCR

Existe atualmente grande preocupação com a melhoria no diagnóstico citopatológico para HPV e para isto tem-se estudado a introdução de critérios morfológicos não-clássicos, tendo em vista a elevada freqüência desta infecção viral bem como o seu potencial carcinogênico. Desta forma, este trabalho objetivou uma releitura de 41 casos positivos para HPV por PCR, cujos critérios inicialmente utilizados foram apenas os clássicos, e introduzir os critérios não clássicos. Os critérios citopatológicos mais observados foram os não clássicos, sendo bi ou multinucleação o mais freqüente, com n=37 (90,24 porcento), seguido de núcleo hipercromático, com n=35 (85,36 porcento) e núcleo em borrão, com n=24 (58,54 porcento). Quanto aos critérios clássicos, a disqueratose foi observada em n=17 casos (41,46 porcento) e a coilocitose n=10 (24,35 porcento), representando o 4º e o 9º critérios em ordem numérica de observação. Foi evidenciado também que quanto mais avançada a lesão diagnosticada pela citopatologia, menor a freqüência de critérios clássicos e maior a de não clássicos. Após a inclusão dos critérios não clássicos, o diagnóstico de HPV elevou-se de 24,39 porcento dos casos para 75,61 porcento, sendo que 40,0 porcento dos ASCUS e 100,0 porcento dos NIC I, NICII, NIC III e cânceres cervicais passaram a ser positivos para o vírus. Este é um fato de suma importância no aprimoramento dos serviços citopatológicos de rastreamento do câncer cervical. Porém, o único caso normal, os dois inflamatórios, os 4 de metaplasia escamosa e três dos 5 casos de ASCUS permaneceram negativos para HPV, representando exames citopatológicos falso negativos. Este fato é bastante preocupante, uma vez que pacientes portadoras deste vírus, independente do estado clínico, possuem maoir probabilidade de desenvolver lesões precursoras e até mesmo cânceres cervicais.

Aplicação do método PCR-RFLP para tipagem de HPV em infecções cervicais de pacientes atendidas no Lepac, Universidade Estadual de Maringá / Application of the method of PCR-RFLP to the knowledge of HPV types in cervical infections from patients assisted in Lepac, State University of Maringá (UEM)

O método da Reação em Cadeia da Polimerase, associado com o Polimorfismo de Fragmentos de DNA obtidos por Enzimas de Restrição (PCR-RFLP) foi, aplicado em 20 amostras clínicas cervicais de pacientes portadoras de anormalidades colpocitológicas atendidas no Lepac, Universidade Estadual de Maringá (UEM). O DNA e o tipo de HPV foram detectados e determinados em todas as amostras analisadas. A grande maioria das amostras cervicais era portadora de tipos de HPV com alto potencial para o desenvolvimento neoplásico. O método PCR-RFLP demonstrou grande poder discriminatório, pois foi capaz de detectar o DNA e determinar o potencial para o desenvolvimento neoplásico de até quatro tipos de HPV presentes de forma concomitante em uma única amostra cervical. Os resultados obtidos demonstraram que esse método pode ser utilizado rotineiramente com alta sensibilidade e reprodutibilidade, sendo um método de escolha na triagem primária de pacientes com risco de desenvolver neoplasias cervicais, contribuindo com informações que auxiliem num possível controle dessa doença